一、物理滅菌方法

1、干熱滅菌法

主要是針對金屬器械和玻璃器皿的消毒，將其放入電熱烘箱內，在150~170℃下維持1~2h后，即可達到滅菌的目的；還有灼燒法滅菌，因其破壞力很強，故只適用于接種環、接種針的滅菌以及帶病原體材料、動物尸體的焚毀等。

2、濕熱滅菌法

是一類利用高溫的水或水蒸氣進行滅菌的方法，通常多指用100℃以上的加壓蒸汽進行滅菌。在相同的溫度和作用時間下，濕熱滅菌比干熱滅菌更有效，因為濕熱蒸汽不但穿透力強，而且還能破壞維持蛋白質空間結構和穩定的氫鍵，即加速這一生命大分子物質的變性。

濕熱滅菌法主要有以下幾種：

（1）高壓蒸汽滅菌法

利用水的沸點隨水蒸氣壓力的增加而上升，以達到100 ℃以上高溫滅菌的方法。 

方法：121℃維持15-20min。112℃維持20-30min。115℃維持20-30min。

應根據滅菌物品的性質或成分選擇滅菌溫度。

例如：生理鹽水、營養瓊脂等培養基用121 ℃。

含葡萄糖、乳糖、氨基酸等培養基用112 ℃。

適用：耐高溫物品，玻璃儀器、含水或不含水的物品。

（2）間歇滅菌法

將待滅菌物品在80-100℃蒸煮15-60min，冷卻后擱置室溫（28-37℃）下過夜，并重復以上過程三遍以上。

其蒸煮過程可殺死微生物的營養體，但不能殺死芽胞，室溫過夜促使殘留的芽孢萌發成營養體，再經蒸煮過程可殺死新的營養體；循環三次以上可保證滅菌的目的。

適用于不耐高溫的物品滅菌，如不適于高壓滅菌的特殊培養基、藥品的滅菌。缺點是麻煩、費時。

（3）巴氏消毒法

這是一種專用于牛奶、啤酒、果酒或醬油等不宜進行高溫滅菌的液態風味食品或調味料的低溫消毒方法。此法可殺滅物料中的無芽孢病原菌，且不影響其原有風味。一般是在60~85℃下處理30分鐘至15秒。

（4）煮沸消毒法

顧名思義就是在100℃下煮沸數分鐘的方法，一般用于日常飲用水的消毒。

3、過濾除菌法

采用濾孔比細菌還小的篩子或濾膜作成各種過濾器，當空氣或液體流經篩子或濾膜時，微生物不能通過濾孔而被阻留在一側，從而達到滅菌的目的。但不能除去病毒。

實驗室中常用的濾器：

濾膜過濾器、蔡氏過濾器、玻璃過濾器、磁土過濾器等。

過濾介質：醋酸纖維素膜、硝酸纖維素膜、聚丙烯膜；

以及石棉板、燒結陶瓷、燒結玻璃等。

應用：對于含酶、血清、維生素和氨基酸等熱敏物質除菌。

4、輻射

紫外線滅菌

使用紫外燈照射，可以根據1W/M3來計算劑量，若以面積計算，一般30W的紫外燈可用于15M2的房間消毒，照射時間為20—30分鐘，有效照射距離為1米左右。

二、化學殺菌消毒

消毒劑:可以抑制或殺滅微生物，但對人體也可能產生有害作用的化學試劑。—主要用于抑制或殺滅物體表面、器械、排泄物和環境中的微生物。

防腐劑:可以抑制或阻止微生物生長，但對人體或動物體的毒性較低的化學藥劑。用于肌體表面，如皮膚、粘膜、傷口等處防止感染，也有的用于食品、飲料藥品的防腐作用。

但現時消毒劑和防腐劑間的界限已并不很嚴格。

消毒防腐劑的作用機理一般有下列三種方式:

1、使微生物蛋白質凝固變性,發生沉淀.如酒精等。

2、破壞菌體的酶系統,影響菌體代謝.如*等。

3、降低微生物表面張力,增加細胞膜的通透性,使細胞發生破裂或溶解.如來蘇兒等酚類物質。